基本培养基和完全培养基的区别

Ⅰ.基本培养基和完全培养基的区别

基本培养基；仅能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基，成为基本培养基。完全培养基；凡可满足一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或者半天然培养基，成为完全培养基。

补充培养基：凡是只能满足相应的营养缺陷型生长需要的组合培养基，称为补充培养基，是在基本培养基中加入该菌株不能合成的营养因子而组成的。

Ⅱ.培养基的配制方法

1、配制用水

培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的

双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。

2、培养基

培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。

3、血清

培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基。

4、抗菌素

为防止培养时期细菌的污染，可在培养基中添加适当抗菌素，一般用量与组织细胞培养相同：卡那霉素100单位/毫升，或双抗--青霉素100单位/毫升，链霉素100微克/毫升。

5、植物血凝素（PHA）

非增殖期的细胞不能制备染色体，如人外周血淋巴细胞，但在离体培养过程中，在PHA的作用下，可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。

经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时。

PHA有粘多糖，蛋白质两种重要成分。粘多糖促使有丝分裂，蛋白质起凝集作用。PHA激活的细胞数随其浓度而增加，直至全部免疫活性细胞均

被激活为止，但PHA浓度过高会引起凝集，一般采用4%浓度为好。

Ⅲ.组合培养基的特点

组合培养基的特点：成分、重演性高。组合培养基又称合成培养基或综合培养基，是一类按微生物的营养要求设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。例如，培养细菌的葡萄糖铵盐培养基，培养放线菌的淀粉硝酸盐培养基（即高氏一号培养基），培养真菌的蔗糖硝酸盐培养基（即察氏培养基）等。

培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。

Ⅳ.肉汤琼脂培养基的制作过程和原理

肉汤培养基是常用的液体培养基，也是制备常用的细菌分离培养基及其他某些培养基的基础。

材料：牛肉、蛋白胨、氯化钠、水（蒸馏水或自来水）、比色管、蒸馏水、10%碳酸氢钠、10%醋酸、0.02%酚红指示剂、吸管等。

制作过程：

1、取新鲜瘦牛肉，除去脂肪及筋膜，切成小块后并用绞肉机绞碎，每500g碎牛肉加水1000ml，混合后置4℃冰箱过夜。

2、次日取出煮沸半小时左右，使肉渣全部凝固，加热过程中不时地用玻璃棒搅拌，以免沉底，也可以不放置冰箱过夜，直接煮沸1小时。

3、用纱布过滤，弃去肉渣（肉渣中的液体应尽量挤净），于滤液中加入1%蛋白胨及0.5%氯化钠，加热溶解，并补足失水至1000 ml 。

4、冷至50℃左右，用精密pH试纸测酸碱度，用校正pH为7.6左右；过碱时，可用10%醋酸校正之。

5、分装于试管中或三角烧瓶中，15磅(121℃)高压蒸气灭菌20～30min，备用。

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