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培养皿和培养基的区别

更新时间: 2023-10-21 01:30:58     

1:培养皿和培养基的区别

培养皿是一种常用的实验室器皿,主要用于微生物或细胞培养,它是由一个平面圆盘状的底和一个盖组成的,一般用塑料或者玻璃制作而成。培养皿的材质基本上分为塑料和玻璃两个种类,玻璃材质的培养皿可以用于植物材料、微生物培养,也可用于动物细胞的贴壁培养。塑料材质的培养皿可能是聚乙烯材料制作而成的,分为一次性的和多次使用的,适合实验室划线、接种以及分离细菌的操作,适合应用于植物材料的培养。

培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。

2:肉汤琼脂培养基的制作过程和原理

肉汤培养基是常用的液体培养基,也是制备常用的细菌分离培养基及其他某些培养基的基础。

材料:牛肉、蛋白胨、氯化钠、水(蒸馏水或自来水)、比色管、蒸馏水、10%碳酸氢钠、10%醋酸、0.02%酚红指示剂、吸管等。

制作过程:

1、取新鲜瘦牛肉,除去脂肪及筋膜,切成小块后并用绞肉机绞碎,每500g碎牛肉加水1000ml,混合后置4℃冰箱过夜。

2、次日取出煮沸半小时左右,使肉渣全部凝固,加热过程中不时地用玻璃棒搅拌,以免沉底,也可以不放置冰箱过夜,直接煮沸1小时。

3、用纱布过滤,弃去肉渣(肉渣中的液体应尽量挤净),于滤液中加入1%蛋白胨及0.5%氯化钠,加热溶解,并补足失水至1000 ml 。

4、冷至50℃左右,用精密pH试纸测酸碱度,用校正pH为7.6左右;过碱时,可用10%醋酸校正之。

5、分装于试管中或三角烧瓶中,15磅(121℃)高压蒸气灭菌20~30min,备用。

3:培养基的种类都包括哪些

培养基按其所含成分,可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。

培养基(Medium)是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。

4:培养基的配制方法

1、配制用水

培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的

双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。

2、培养基

培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)调pH至7.2-7.4,若pH值超过7.6或远低于6.8,则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌,使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。

3、血清

培养中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高压灭菌,无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体,置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定,一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制,可选用无血清培养基。

4、抗菌素

为防止培养时期细菌的污染,可在培养基中添加适当抗菌素,一般用量与组织细胞培养相同:卡那霉素100单位/毫升,或双抗--青霉素100单位/毫升,链霉素100微克/毫升。

5、植物血凝素(PHA)

非增殖期的细胞不能制备染色体,如人外周血淋巴细胞,但在离体培养过程中,在PHA的作用下,可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。

经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时。

PHA有粘多糖,蛋白质两种重要成分。粘多糖促使有丝分裂,蛋白质起凝集作用。PHA激活的细胞数随其浓度而增加,直至全部免疫活性细胞均

被激活为止,但PHA浓度过高会引起凝集,一般采用4%浓度为好。

关键词: 培养皿 培养基 区别

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