培养基的配制方法

一：培养基的配制方法

1、配制用水

培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的

双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。

2、培养基

培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。

3、血清

培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基。

4、抗菌素

为防止培养时期细菌的污染，可在培养基中添加适当抗菌素，一般用量与组织细胞培养相同：卡那霉素100单位/毫升，或双抗--青霉素100单位/毫升，链霉素100微克/毫升。

5、植物血凝素（PHA）

非增殖期的细胞不能制备染色体，如人外周血淋巴细胞，但在离体培养过程中，在PHA的作用下，可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。

经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时。

PHA有粘多糖，蛋白质两种重要成分。粘多糖促使有丝分裂，蛋白质起凝集作用。PHA激活的细胞数随其浓度而增加，直至全部免疫活性细胞均

被激活为止，但PHA浓度过高会引起凝集，一般采用4%浓度为好。

二：选择培养基的类型有哪些

弱选择性培养基、强选择性培养基以及选择性增菌培养基。其中，弱选择性培养基包括EMB、中国蓝、MAC、SMAC等，选择性增菌培养基包括碱性蛋白胨水、高盐肉汤等。基础培养基是指肉汤，是含牛肉浸液和蛋白胨，广泛用于细菌的增菌、检验，也是制备其他培养基的基础成分。

三：查氏培养基的基本原理

基本原理：培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物，培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水，根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法；

牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基，由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。

四：WPM培养基和MS培养基的区别

区别：

1、MS培养基：无机盐和离子浓度较高，是较稳定的平衡溶液，其养分数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要，其硝酸钾含量较高，可用于植物器官、花药、细胞和原生质体培养；

2、WPM培养基：一种低浓度培养基，适合于多种木本植物的培养。

五：培养皿和培养基的区别

培养皿是一种常用的实验室器皿，主要用于微生物或细胞培养，它是由一个平面圆盘状的底和一个盖组成的，一般用塑料或者玻璃制作而成。培养皿的材质基本上分为塑料和玻璃两个种类，玻璃材质的培养皿可以用于植物材料、微生物培养，也可用于动物细胞的贴壁培养。塑料材质的培养皿可能是聚乙烯材料制作而成的，分为一次性的和多次使用的，适合实验室划线、接种以及分离细菌的操作，适合应用于植物材料的培养。

培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。

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